TLR2/NFκB-Luc/HEK293

      Toll 樣受體（TLR）是一種模式識(shí)別受體（PRR），高度保守，可識(shí)別各種類(lèi)型的微 生物病原體相關(guān)模式分子（PAMP）。在人類(lèi)中發(fā)現(xiàn)了 10 個(gè) Toll 樣受體家族（TLR1-10） 成員，在小鼠中發(fā)現(xiàn)了 12 個(gè)成員（TLR1-9、TLR11 and TLR13）。TLR1、TLR2、TLR4、 TLR5 和 TLR6 分布在細(xì)胞膜表面；TLR3、TLR7、TLR8、TLR9 和 TLR10 分布在細(xì)胞內(nèi) 涵體膜表面（TLR3 識(shí)別 dsRNA，TLR9 識(shí)別 dsDNA）。TLRs 下游信號(hào)的激活主要依賴于 兩類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子：NF-κB 和干擾調(diào)節(jié)因子（IRFs），它們主要誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子和 I 型干擾 素（IFN）的產(chǎn)生。

      TLR2 是唯一一種與兩種以上其他類(lèi)型 TLR 形成功能性異二聚體的 TLR，與 TLR1、 TLR6 形成二聚體，在某些情況下與 TLR4 形成二聚體。TLR2 還與不同的非 TLR 分子相互 作用，從而能夠識(shí)別來(lái)自所有微生物（包括病毒、真菌、細(xì)菌和寄生蟲(chóng)）的多種 PAMP。 TLR2 可以感知在革蘭氏陽(yáng)性菌外膜上表達(dá)的高度保守的脂蛋白，以及與其共受體 CD14 相 關(guān)的一些革蘭氏陰性菌的膜抗原，例如脂多糖（LPS）。

      TLR2 主要依賴于 MyD88 和 TIRAP 接頭蛋白進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。MyD88 依賴性通路涉及 以逐步方式介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)的死亡結(jié)構(gòu)域相互作用。具體來(lái)說(shuō)，MyD88 募集是間接的， 由 TIRAP 介導(dǎo)。然后，激活的 MyD88 依次觸發(fā) IRAK4、IRAK1 和 IRAK2 的磷酸化。 IRAK 復(fù)合物與 TRAF6 結(jié)合，激活 TAK1、TAB2 和 TAB3 的復(fù)合物，TAK1 磷酸化 IKKα 和 IKKβ，IKK 磷酸化 IκB 被標(biāo)記降解，最終導(dǎo)致通過(guò) NF-κB 和 AP-1 產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子， 并激活 MAPK，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和存活。

      TLR2 NFκB-Luc HEK293 報(bào)告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) TLR2 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程， 原理見(jiàn)下圖所示。
 

Figure 1. TLR2 NFκB-Luc HEK293 細(xì)胞模型原理圖

MEM+10%FBS+1% NEAA+1 mM NaP+100 μg/ml hygromycin+1 μg/ml puromycin